产品货号:
GL2050
中文名称:
γ-谷氨酰基转移酶(GGT)检测试剂盒(重氮微板法)
英文名称:
γ-Glutamyl Transferase Assay Kit
产品规格:
100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
简要说明:
工作原理:
背景资料:
产品组成:
保存:2~8℃,避光,有效期6个月。
用户自备:
蒸馏水、离心管、水浴锅或恒温箱、96孔板、酶标仪。
注意事项:
用法参考:
计算方法:
相关搜索:γ-谷氨酰基转移酶(GGT)检测试剂盒(重氮微板法),GGT检测,γ-Glutamyl Transferase Assay Kit
本制品是百奥莱博公司基于重氮反应比色法开发的,专门用于血清、血浆、组织等样品中的γ-谷氨酰胺转移酶活性定量检测的试剂盒。
工作原理:
以萘胺盐为底物,在GGT催化下γ-谷氨酰基转移到甘肽分子上,同时释放出游离的α-萘胺,后者与重氮盐反应,产生红色化合物,其颜色深浅与GGT浓度呈正比,通过酶标仪检测530nm处吸光度,进而计算酶的活性。
背景资料:
L-γ-谷氨酰基转移酶(GGT或γ-GT)是催化γ-谷氨酰基移换反应的酶,γ-谷氨酰基从谷胱甘肽或其他含γ-谷氨酰基物质中转移到另一肽或氨基酸分子上,GGT主要存在于肝细胞膜和微粒体上,参与谷胱甘肽的代谢,血清中主要来自肝胆系统,当肝内合成亢进或胆汁排出受阻时血清中GGT往往容易增高。
产品组成:
| 组分 | 规格 | 保存 |
| 萘胺标准(1.5mM) | 1mL | 4℃,避光 |
| GGT Assay Buffer | 5mL | 4℃ |
| GGT显色剂 | 1支 | RT |
| 显色稀释液 | 30mL | 4℃,避光 |
保存:2~8℃,避光,有效期6个月。
用户自备:
蒸馏水、离心管、水浴锅或恒温箱、96孔板、酶标仪。
注意事项:
- 血清或EDTA抗凝血检测效果较好,肝素钠、柠檬酸、草酸、氟化物等抗凝血会引起浑浊或者抑制酶活性(10~15%)。
- 尽量避免使用溶血样品。
- GGT活力20~100U/L颜色由淡紫红色到紫红色梯度变化。
- 本制品仅用于科研领域,不能用于临床诊断或其他用途。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。
用法参考:
- 准备样品:
- 血浆、血清样品:血浆、血清按照常规方法制备,可以直接用于该试剂盒的测定,-20℃保存,用于GGT的检测。
- 细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行匀浆,低速离心取上清,-20℃保存,用于GGT的检测。
- 选做:样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的GGT含量。
- 血浆、血清样品:血浆、血清按照常规方法制备,可以直接用于该试剂盒的测定,-20℃保存,用于GGT的检测。
- 配制GGT显色工作液:取GGT显色剂1支,加蒸馏水1mL,充分溶解,即为GGT显色储存液,该GGT显色储存液为过量(4℃保存,30天有效);临用前按GGT显色储存液∶显色稀释液=1∶1000的比例混合,即为GGT显色工作液,4℃保存,24h有效。
- 配制系列萘胺标准:取适量的萘胺标准(1.5mM),按萘胺标准(1.5mM)∶GGT Assay Buffer=1∶9的比例混合,即为萘胺标准工作液-萘胺标准(0.15mM),按下表配制系列标准品。
成分(mL) 0 1 2 3 4 5 萘胺标准(0.15mM) 0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 GGT Assay Buffer 0.1 0.08 0.06 0.04 0.02 0 相当于GGT(U/L) 0 20 40 60 80 100 - GGT酶促反应:取96孔板,按照下表设置对照孔、标准孔、测定孔,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡。如果样品的酶活性过高,可减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
成分(μL) 标准孔 对照孔 测定孔 蒸馏水 2 — — 待测样品(如血清等) — — 2 系列萘胺标准(1~5号) 20 — — GGT Assay Buffer(37℃预温) — 20 20 混匀,37℃准确孵育15min。(标准孔不需要孵育) GGT显色工作液 200 200 200 待测样品(如血清等) — 2 — - GGT检测:混匀,室温放置10min,以“0”号标准孔调零,样品测定以“对照孔”调零,酶标仪测定530nm处标准孔、测定孔的吸光度。
计算方法:
以标准孔活力单位(U/L)为横坐标,以吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,在标准曲线上查出待测样品的GGT酶活力单位。
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